現(xiàn)代科學(xué)的發(fā)展開(kāi)啟了腫瘤個(gè)性化治療新紀(jì)元。目前腫瘤治療過(guò)程中遇到的最大挑戰(zhàn)是如何確定不同患者的最佳治療藥物。傳統(tǒng)的檢測(cè)手段和經(jīng)驗(yàn)用藥往往存在很大的個(gè)體療效差異，這也是腫瘤治療過(guò)程中的一大難題。

循環(huán)腫瘤細(xì)胞(Circulating Tumor Cell，CTC )是自發(fā)或因診療操作脫離實(shí)體瘤原發(fā)灶或轉(zhuǎn)移灶進(jìn)入血液循環(huán)系統(tǒng)的腫瘤細(xì)胞。CTC是遠(yuǎn)處器官轉(zhuǎn)移瘤的種子，與絕大多數(shù)癌癥的轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)相關(guān)。

1. 癌癥轉(zhuǎn)移機(jī)制

①細(xì)胞生長(zhǎng)原位病灶     

②細(xì)胞突破基底膜

③入侵        

④隨血液流動(dòng)        

⑤黏附在毛細(xì)血管壁上

⑥從血管中逃離（溢出） 

⑦通過(guò)增殖形成轉(zhuǎn)移

2. CTC的分類

CTC以不同形態(tài)存在于外周血中，既有游離的單個(gè)CTC，也有聚集成團(tuán)的細(xì)胞團(tuán)——腫瘤微栓子（Circulating Tumor Microemboli，CTM）。腫瘤細(xì)胞在進(jìn)入外周血循環(huán)的過(guò)程中會(huì)發(fā)生上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)變（Epithelial Mesenchymal Transition，EMT），多數(shù)惡性腫瘤細(xì)胞在脫離原發(fā)灶的過(guò)程中發(fā)生EMT。研究表明，CTM和間質(zhì)細(xì)胞表型CTC具有更強(qiáng)的轉(zhuǎn)移潛能。

3. CTC的富集

液體活檢技術(shù)發(fā)展至今一直面臨的最大問(wèn)題就是如何在樣本起始量有限的情況下獲取本來(lái)就極其稀少的物質(zhì)。前一篇講液體活檢“大馬車”ctDNA檢測(cè)的推文里提到ctDNA的特征：含量濃度低，而CTC的特征是游離細(xì)胞數(shù)量極少，每毫升血液里面含有的CTC 是個(gè)位數(shù)，而白細(xì)胞的數(shù)量級(jí)是106-107，紅細(xì)胞的數(shù)量則更多，高效分離和富集這些血液中的“不速之客”，是CTC檢測(cè)技術(shù)的基礎(chǔ)。

*從全血中分離CTC的方法

上圖直觀展示了三種捕獲CTC的方法：免疫親合法、物理特性富集、直接成像，較為成熟的是前兩種技術(shù)。免疫親和法主要是根據(jù)CTC 表面表達(dá)的特異性的蛋白將CTC 篩選出來(lái)，物理特性富集主要是根據(jù)CTC 的大小和密度等特性將這些細(xì)胞篩選出來(lái)。

總而言之，物理特性富集法中密度梯度離心和過(guò)濾法操作簡(jiǎn)單，成本低廉，不依賴細(xì)胞表面抗體的表達(dá)，捕獲的細(xì)胞數(shù)量多，能夠克服CTC 在蛋白表達(dá)上的異質(zhì)性，但是無(wú)法克服CTC 在物理特性的異質(zhì)性。生化特性法操作復(fù)雜，成本相對(duì)更高。未來(lái)，兩者結(jié)合的微流控芯片將是CTC 分離富集發(fā)展的趨勢(shì)。

4. CTC檢測(cè)的臨床應(yīng)用

4.1腫瘤輔助診斷

對(duì)尚未完善病理診斷的患者，CTC 可聯(lián)合影像學(xué)、血清學(xué)做為輔助判斷病灶良惡性的指標(biāo)。同時(shí)，CTC是對(duì)原發(fā)灶與轉(zhuǎn)移灶信息的全面反映，可彌補(bǔ)現(xiàn)有傳統(tǒng)TNM 分期的不足，提示早期微轉(zhuǎn)移的存在風(fēng)險(xiǎn)。

*顯示了不同癌癥在7.5ml血中CTC計(jì)數(shù)的差異（橫坐標(biāo)分別代表：健康捐助者、良性的疾病患者、轉(zhuǎn)移性前列腺癌、乳腺癌、肺癌、卵巢癌、結(jié)腸癌、胰腺癌、和其他癌癥患者）

4.2藥物療效評(píng)估與耐藥檢測(cè)

因其無(wú)創(chuàng)便捷的特性可對(duì)包括術(shù)前新輔助化療、術(shù)后輔助化療、晚期放化療、靶向治療、生物免疫治療等在內(nèi)的各階段治療進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)治療效果，不僅可以實(shí)時(shí)快速判斷療效，還可動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)耐藥發(fā)生。（建議治療前1-3天進(jìn)行CTC計(jì)數(shù)檢測(cè)，治療后定期再次檢測(cè)，動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)治療效果）

4.3 預(yù)后評(píng)估

*根據(jù)(A)影像學(xué)緩解情況，(B)影像學(xué)檢查±1個(gè)月內(nèi)循環(huán)腫瘤細(xì)胞數(shù)目以及(C)影像學(xué)緩解情況結(jié)合影像學(xué)檢查±1個(gè)月內(nèi)CTC數(shù)目，分析轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌患者的總體生存狀況（總體生存期(OS)從基線采血時(shí)開(kāi)始計(jì)算）

上圖的前瞻性多中心研究，采用免疫磁性分離法在基線時(shí)以及開(kāi)始一線、二線或三線治療后對(duì)430例mCRC患者進(jìn)行外周血CTC計(jì)數(shù)。治療前和治療期間的CTC數(shù)目是轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌患者PFS和OS的一項(xiàng)獨(dú)立預(yù)測(cè)因子。除影像學(xué)檢查外， CTC能夠提供更多的預(yù)后信息。

4.4復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移監(jiān)測(cè)

上述成果來(lái)自復(fù)旦大學(xué)的研究人員，在研究中觀察到手術(shù)后1個(gè)月，患者的CTC陽(yáng)性率和CTC7.5(次方)值顯著下降。而CTC7.5(次方) 持續(xù)性<2的患者相比CTC7.5(次方) 持續(xù)性≥2的患者，前者復(fù)發(fā)率顯著較低。證實(shí)EpCAM+ CTC或可作為治療反應(yīng)的一個(gè)實(shí)時(shí)監(jiān)控參數(shù)，并有可能是肝癌復(fù)發(fā)一個(gè)有潛力的治療靶點(diǎn)。

4.5個(gè)體化治療

上述四點(diǎn)應(yīng)用從CTC計(jì)數(shù)層面提供預(yù)后預(yù)測(cè)、復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估和療效監(jiān)測(cè)，更進(jìn)一步的，分離CTC后，可連接下游的分子檢測(cè)技術(shù)，比如FISH平臺(tái)、PCR平臺(tái)、測(cè)序平臺(tái)等，來(lái)反映患者腫瘤的基因信息，指導(dǎo)個(gè)體化用藥。